Beş güc:
● Nuklein turşusunun çıxarılması və təmizlənmiş mərhələ ilə konfiqurasiya edilmiş alət
● Ultrasəs çıxarma modulu ilə konfiqurasiya edilmiş alət
● Tam avtomatik konfiqurasiya edilmiş alət
● Dəyişən temperatur gücləndiricisi ilə konfiqurasiya edilmiş alət
● Tam qapalı reagent dəsti ilə konfiqurasiya edilmiş cihaz
1. Nuklein turşusunu aşkar edən reagentləri çıxarmaq və təmizləmək lazımdırmı?
Nuklein turşusunun aşkarlanması prinsipi aşağıdakı kimidir: primerin təsiri altında DNT polimeraza şablon DNT/RNT üzərində zəncirvari reaksiya gücləndirilməsini həyata keçirmək üçün istifadə olunur (NA-nın tərs transkripsiyasını tələb edir) və sonra müəyyən etmək üçün buraxılan flüoresan siqnalın miqdarı aşkar edilir. nümunədə aşkar ediləcək patogenin nuklein turşusunun (DNT/RNT) olub-olmaması.
1)Çıxarılmamış və ya təmizlənməmiş nümunələr son nəticəyə təsir edən bir çox komponentdən ibarət ola bilər: nukleaza (hədəf nuklein turşusunu həll edə və yalançı mənfiyə səbəb ola bilər), proteaza (DNT polimerazını azaldaraq yalançı mənfiyə səbəb ola bilər), ağır metal duz (sintazanın inaktivasiyasına gətirib çıxarır və yalançı pozitivliyə səbəb olur), həddindən artıq turşu və ya çox qələvi PH (reaksiya uğursuzluğa səbəb ola bilər), natamam RNT (yanlış mənfi əks transkripsiya uğursuzluğuna səbəb olur).
2) Bəzi nümunələri birbaşa gücləndirmək çətindir: Qram-müsbət və bəzi parazitlər, qalın hüceyrə divarları və digər strukturlarına görə, nuklein turşusunun çıxarılması və təmizlənməsi prosesindən keçməsələr, ekstraksiyası olmayan dəst bu cür nümunələr üçün uğursuz ola bilər. nümunələri.
Buna görə də nuklein turşusunun çıxarılması mərhələsi ilə konfiqurasiya edilmiş test dəsti və ya aləti seçmək tövsiyə olunur.
2. Kimyəvi ekstraksiya və ya fiziki ultrasəs parçalanma çıxarılması?
Ümumiyyətlə, kimyəvi ekstraksiya ilkin müalicə və təmizlənmənin əksəriyyətinə tətbiq oluna bilər.Bununla belə, qalın divarlı qram-müsbət bakteriyalarda və bəzi parazitlərdə kimyəvi ekstraksiya effektiv nuklein turşusu şablonlarını əldə edə bilmir və nəticədə yanlış mənfi aşkarlanır.Bundan əlavə, kimyəvi ekstraksiya tez-tez güclü agentlərdən istifadə edir, əgər elüsyon hərtərəfli deyilsə, reaksiya sisteminə güclü qələvi daxil etmək asandır, nəticədə qeyri-dəqiq nəticələr əldə edilir.
Ultrasonik parçalanma fiziki sarsıdıcıdan istifadə edir ki, bu da insan istifadəsi üçün POCT sahəsində aparıcı müəssisə olan GeneXpert tərəfindən uğurla istifadə olunur və bəzi mürəkkəb nümunələrin (məsələn, Mycobacterium tuberculosis) nuklein turşusunun çıxarılmasında mütləq üstünlüyə malikdir.
Buna görə də, nuklein turşusunun çıxarılması mərhələsi ilə konfiqurasiya edilmiş test dəsti və ya aləti seçmək tövsiyə olunur.və ultrasəs çıxarma modulu varsa optimaldır.
3. Manual , Yarı avtomatik və tam avtomatik?
Bu, əmək haqqı və iş səmərəliliyi problemidir.Hal-hazırda, kifayət qədər işçi heyəti olmayan ev heyvanları xəstəxanaları və nuklein turşusunun çıxarılması və aşkarlanması müəyyən bacarıq və təcrübə tələb edən bir işdir.Şübhə yoxdur ki, tam avtomatik nuklein turşusu çıxaran və aşkarlayan maşın mükəmməl seçimdir.
4. Daimi temperaturun gücləndirilməsi və ya dəyişkən temperaturun gücləndirilməsi?
Gücləndirmə reaksiyası nuklein turşusunun aşkarlanması əlaqəsidir və bu əlaqədə iştirak edən peşəkar texnologiya mürəkkəbdir.Kobud desək, nuklein turşusunu gücləndirmək üçün fermentlər istifadə olunur.Gücləndirmə prosesində gücləndirilmiş flüoressensiya siqnalı və ya daxil edilmiş flüoresan siqnalı aşkar edilir.Ümumiyyətlə, flüoresan siqnalı nə qədər tez görünsə, nümunənin hədəf gen məzmunu bir o qədər çox olur.
Daimi temperaturun gücləndirilməsi sabit bir temperaturda nuklein turşusunun gücləndirilməsidir, dəyişkən temperaturun gücləndirilməsi isə ciddi şəkildə denaturasiya-tavlama-uzatmaya uyğun olaraq siklik gücləndirmədir.Sabit temperatur gücləndirmə vaxtı həyata keçirildi, dəyişkən temperatur gücləndirmə vaxtı isə cihazın temperaturun yüksəlməsi və düşmə sürətindən çox təsirlənir (hazırda bir çox istehsalçı təxminən 30 dəqiqə ərzində 40 gücləndirmə dövrü edə bilmişdir).
Laboratoriya şəraiti yaxşı olarsa və rayonlaşdırma ciddidirsə, ikisi arasında dəqiqlik fərqinin böyük olmayacağını söyləmək məqsədəuyğundur.Bununla belə, dəyişən temperaturun gücləndirilməsi nisbətən qısa müddətdə daha çox nuklein turşusu məhsulunu sintez edəcəkdir.Ciddi rayonlaşdırma və peşəkar təlim işçiləri olmayan laboratoriyalar üçün nuklein turşusunun aerozol sızması riski daha çox olacaq, sızma baş verdikdən sonra yalançı pozitiv baş verəcək və bunu aradan qaldırmaq olduqca çətin olacaq.
Bundan əlavə, Sabit temperaturun gücləndirilməsi nümunə kompleks olduqda qeyri-spesifik gücləndirməyə daha çox meyllidir (nisbi reaksiya temperaturu aşağıdır və uzadılma temperaturu nə qədər yüksəkdirsə, primerin bağlanma spesifikliyi bir o qədər yaxşıdır).
Mövcud texnologiyaya gəldikdə, dəyişən temperaturun gücləndirilməsi daha etibarlıdır.
5. Nuklein turşusunun gücləndirilməsi məhsullarının sızması riskindən necə qorunmaq olar?
Hal-hazırda, bir çox istehsalçı sürtünmə ilə möhürlənmiş nuklein turşusu reaksiya borusu kimi vəzi tipli PZR borusunu seçir və dəyişən temperaturda dəyişən temperatur denaturasiyasında temperatur denaturasiyası PCR gücləndirilməsi 90 dərəcəyə çatır.
Santigrad.İstilik ilə təkrarlanan genişlənmə və soyuqla daralma prosesi PCR borusunun möhürlənməsi üçün böyük problemdir və vəzi tipli PZR borusunun sızmasına səbəb olmaq nisbətən asandır.
Reaksiya məhsulunun sızmasının qarşısını almaq üçün reaksiyanı tamamilə möhürlənmiş dəst/boru ilə qəbul etmək üstünlük təşkil edir.Nuklein turşusunun çıxarılması və aşkarlanması üçün tam möhürlənmiş dəst hazırlansaydı, mükəmməl olardı.
Beləliklə, New Tech-in yeni tam avtomatik nuklein turşusu çıxaran və aşkarlayan maşını yuxarıda göstərilən beş optimal seçimə malikdir.
Göndərmə vaxtı: 09 avqust 2023-cü il